1、簡述：薄層色譜法，是將適宜的固定相涂布于玻璃板上，成一均勻薄層。等點樣、展開后，與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比，用以進行藥品的鑒別，雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。

　　2、儀器與材料：

　　2.1 玻板：除另有規(guī)定外，用5cm×20cm，10cm×20cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑，平整、洗凈后的不附水珠，晾干。

　　2.2 固定相或載體：最常用的有硅膠G、硅膠GF、硅膠H、硅膠HF254，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素F254等。其顆粒大小，一般要求直徑為10-40μm。薄層涂布，一般可分無粘合劑和含粘合劑兩種;前者系將固定相直接涂布于玻璃板上，后者系在固定相中加入一定量的粘合劑，一般常用10-15%煅石膏(CaSO4·2H2O在140℃烘4小時)，混勻后加水適量使用，或用羧甲基纖維素鈉水溶液(0.5-0.7%)適量調(diào)成糊狀，均勻涂布于玻璃板上。也有含一定展開液或緩沖液的薄層。

　　2.3 涂布器：應(yīng)能使固定相或載體在玻璃板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

　　2.4 點樣器：常用具支架的微量注射器或定時毛細管，應(yīng)能使點樣位置正確集中。

　　2.5 展開室：應(yīng)使用適合薄層板大小的玻璃制薄層色譜展開缸，并有嚴(yán)密蓋子，除另有規(guī)定外，底部應(yīng)平整光滑，應(yīng)便于觀察。

　　3、操作方法：

　　3.1 薄層板制備：除另有規(guī)定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的泡后，倒入涂布器中，在玻璃板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2-0.3mm)，取下涂好薄層的玻璃板，置水平臺上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘。即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。

　　3.2 點樣：除另有規(guī)定外，用點樣器點樣于薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊2.0cm，點樣直徑為2-4mm，點間距離約為1.5-2.0cm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

　　3.3 展開：展開室如需預(yù)先用展開劑飽和，可在室中加入足夠量的展開劑，并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封室頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5-1.0cm(切勿將樣點浸入展開劑中)，密封室蓋，等展開至規(guī)定距離(一般為10-15cm)，取出薄層板，晾干，按各品種項下的規(guī)定檢測，如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量，則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點及使用說明，結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下，將供試品與對照品在同一塊薄層上展開后掃描，進行比較并計算定量，以減少誤差。各種供試品，只有得到分離度和重現(xiàn)性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結(jié)果。

　　4、注意事項：

　　4.1 所用玻璃板應(yīng)洗凈不掛水珠，光滑平整。

　　4.2 鋪板要均勻，厚度適宜，并于室溫下晾干后在110℃活化30分鐘，置于有干燥劑的干燥箱或干燥器中備用。

　　4.3 點樣點一般為圓點，不能太大。